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如何正確選擇搖床振幅?

時間:如何正確選擇搖床振幅? 來源: 點擊:2776次

么是搖床的振幅?

搖床的振幅指托盤在做圓周運動時候的直徑,有時候我們也叫“振蕩直徑”或“軌道直徑”符號:?。作為標準,Infors提供振幅為3mm,25mm和50mm的搖床

什么是氧氣傳遞效率(OTR)?

氧氣傳遞效率是指,氧氣從大氣中傳入到液體中的效率。 OTR數(shù)值越高,氧傳遞效率越高。

振幅和轉(zhuǎn)速的影響

這兩個因素都會影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合。 混合效果越好,氧傳遞速率(OTR)就越好。遵循這些指導原則,可以選擇最適合的振幅和轉(zhuǎn)速。

一般來說,選擇25mm振幅可以作為萬能振幅應用于所有培養(yǎng)。

正因為如此,大多搖床的振幅都是25毫米。在一些應用中,如果對氧傳遞/細胞生長有特殊的限制,可能會選擇一些特殊的振幅。

細菌,酵母和真菌培養(yǎng):

搖瓶中的氧氣傳遞效率比生物反應器低得多。多數(shù)情況下氧傳遞可能是搖瓶培養(yǎng)的限制因素。 振幅與錐形培養(yǎng)瓶的大小相關:大瓶使用大振幅。

建議:25mm振幅應用于從25毫升到2升的錐形培養(yǎng)瓶

50mm振幅應用于2升至5升的錐形培養(yǎng)瓶

細胞培養(yǎng):

然而,哺乳動物細胞培養(yǎng)對氧氣的需求相對較低,較低的功率輸入即可。

* 對于250mL搖瓶,在較為寬廣的振幅和振速范圍(20-60mm振幅;100-300rpm)都可以提供足夠的氧氣傳遞。

* 如果直徑較大的燒瓶(Fernbach燒瓶)推薦使用50毫米振幅

* 使用一次性培養(yǎng)袋,推薦使用50mm振幅。
微孔板和深孔板:

對微孔板和深孔板有兩種不同的方法可以獲得最大的氧氣轉(zhuǎn)移!

* 使用50mm振幅,轉(zhuǎn)速不低于250rpm 

* 使用3mm振幅,轉(zhuǎn)速在800-1000rpm

請注意以下幾點

在許多情況下即使選擇了合理的振幅,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因為培養(yǎng)量的增加會受到多個因素影響。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,那么無論其他因素有多好,培養(yǎng)量的增長都是有限的,或者可以這樣說,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時,振幅的正確選擇會得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,碳源若是受限因素,無論氧傳遞效果多好,也不會達到理想的培養(yǎng)量。

振幅和轉(zhuǎn)速

振幅和轉(zhuǎn)速都會對氧傳遞造成影響。如果在轉(zhuǎn)速很低(比如100rpm)的細胞培養(yǎng)中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響。要達到最高的氧傳遞效果,首先是盡可能的提高轉(zhuǎn)速,托盤會適當?shù)钠胶廪D(zhuǎn)速。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長,一些對剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉(zhuǎn)速會導致培養(yǎng)物死亡。

其他影響因素

其他因素對氧傳遞也會有影響:

* 裝液量:錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達到最大氧傳遞,裝液量不能超過10%。永遠不要將裝液量達到50%。

* 擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,擾流板都有效提高氧傳遞。有些廠家推薦使用“超高產(chǎn)量”培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會增大液體摩擦力,搖床可能會達不到最大設定轉(zhuǎn)速。 

振幅和轉(zhuǎn)速的關聯(lián)關系

搖瓶中的離心力可以通過下面公式計算:FC=rpm2 ×振幅

離心力和振幅間存在線性關系:如果使用25mm振幅 到 50mm振幅(轉(zhuǎn)速相同),離心力增加了2倍

離心力和轉(zhuǎn)速存在平方關系:如果轉(zhuǎn)速提高到2倍(振幅相同),離心力提高4倍。如果轉(zhuǎn)速提高到3倍,離心力則提高9倍!

如果用振幅25mm,在給定的速度下,進行培養(yǎng)。如果希望用振幅50mm,達到相同的離心力,轉(zhuǎn)速應該用1/2的平方根計算,因此您應該使用70%的轉(zhuǎn)速,達到形同的培養(yǎng)條件。

 


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